domingo, 30 de agosto de 2020

Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos en EPOC

Tipo de edición: In vivo y Ex vivo en célula somática pulmonares

Dirigido hacia: ADN, Inactivación dirigido a gen SPDEF factor similar a Ets que contiene un dominio con punta SAM está implicado en la hipersecreción de moco en la EPOC.

Dirigido por:  CRISPR- dCas9 

Vectores: se ligaron en BSMB plásmido I-digerido pMLM3636

Órgano a tratar: línea celular epitelial alveolar humana A549

Vía de administración: No especifica 

Resultados:

Corto plazo: Se redujo con éxito la expresión génica relacionada con el moco mediante el silenciamiento dirigido de SPDEF en células A549.

Mediano plazo: Reducción de la hipersecreción de moco asociada con tos y producción de esputo en pacientes con EPOC

Largo plazo: Será interesante investigar si este efecto también se observa dentro de los modelos más relevantes de hipersecreción de moco en el futuro.

Referencia bibliográfica:

domingo, 23 de agosto de 2020

Terapia con Stem Cells

Tema: Efectos de las células madre mesenquimales derivadas de la gelatina de Wharton sobre la enfermedad pulmonar obstructiva crónica.

Tipo de Stem Cell: Células Madre Mesenquimales Alogénicas (MSC) 

Método de obtención: 

I. Se recogieron tejidos del cordón umbilical obtenidos mediante parto normal o cesárea de madres sanas

II. El tejido del cordón umbilical se recortó y se trató con colagenasa I.

III. Se cultivó en medio de Eagle modificado por Dulbecco complementado con suero bovino fetal (FBS) al 10%, penicilina y estreptomicina al 1%, plasmocina, factor de crecimiento derivado de plaquetas y crecimiento de fibroblastos.

Vía de administración:  Es posible mediante la inyección directa en los bronquios y la inyección intravenosa.

Resultados 

Corto plazo: Se confirmó la expresión de CD14, CD34, CD45, CD73, CD90 y CD105 mediante citometría de flujo para determinar si las células cultivadas tenían el fenotipo especificado por el estándar internacional de MSC.

Mediano plazo: Los efectos antiinflamatorios de las MSC puede disminuir la inflamación, lo que mejora la función pulmonar.  

Largo plazo:No hubo toxicidades por infusión ni muertes o eventos adversos graves considerados relacionados con la administración de MSC.

Células madre mesenquimales, tejido del cordón umbilical, sangre ...

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA: 

domingo, 16 de agosto de 2020

Recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza/ Transformación bacteriana.

En la transformación la bacteria receptora acepta moléculas desnudas de ADN que penetran por su pared desde el medio externo. El ADN que se incorpora puede ser simple o doble cadena, incluyendo plásmidos completos que pueden ser captados e introducidos a la célula receptora por un sistema de secreción de tipo IV (SSTIV). Estos eventos ocurren de forma natural cuando las bacterias receptoras comparten su ecosistema con una población de bacterias donadoras que muere y cuyos cromosomas y/o plásmidos se fragmentan. (1)

ADN recombinante artificial en EPOC 

En este estudio, se utilizo un enfoque de edición de genes CRISPR / Cas9 para disminuir los agregados hepáticos y aumentar los niveles sistémicos de AAT-M. También se administró un segundo virus adenoasociado, que proporcionó la plantilla del donante para corregir la mutación Z. La edición de genes CRISPR puede reducir de manera eficiente la expresión hepática de AAT-Z y restaurar niveles modestos de AAT-M, siendo una opción terapéutica. (2)

Proteina recombinante de células club 16 (CC16) 

En particular, se descubrió que el aumento de los niveles de CC16 en las muestras de plasma y BALF se asociaba con una mejor displasia bronquial después de dejar de fumar. Se ha informado que la sobreexpresión de CC16 mediada por adenovirus en las células epiteliales de las vías respiratorias resultó en una reducción de la inflamación pulmonar inducida por CS, y que este efecto se asocia con una activación reducida de NF-κB en el pulmón (3)

Transgénico en plantas/ Maíz Bt.    

La modificación genética es utilizada para mejorar los productos agrícolas como el maíz, para conseguir resistencia a plagas. En el maíz normal se incorpora una proteína natural Cry IAb, que posee la bacteria Bacillus thuringensis (Bt). La proteína Cry ILab es tóxica para un grupo de lepidópteros, pero es inofensiva para el hombre y el resto de la fauna terrestre y acuática. Las proteínas Bt se han usado con un historial impecable de seguridad durante casi 40 años, como ingredientes de insecticidas de origen microbiano, y proceden de la bacteria Bacillus thuringensis. (4)

 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

  1. https://www.fmed.uba.ar/sites/default/files/2019-03/T1%20Texto%20Clase%201-Gen%C3%A9tica%20y%20Transm%20Horiz-Centron%202019.pdf
  2. https://sci-hub.tw/10.1089/hum.2017.227
  3. https://www.spandidos-publications.com/10.3892/mmr.2018.9216
  4. https://www.interempresas.net/Grandes-cultivos/Articulos/165815-El-maiz-Bt-transgenico.html